動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染,如何評(píng)估不同組織的干擾效率?
運(yùn)用體內(nèi)試劑Entranster進(jìn)行體內(nèi)轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)后,針對(duì)具體的組織器官,不同的注射方法會(huì)明顯影響效果。比如,大腦神經(jīng)細(xì)胞的體內(nèi)轉(zhuǎn)染,可以采用尾靜脈注射和側(cè)腦室注射,用側(cè)腦室的方法就好得多。再比如,肺部的體內(nèi)轉(zhuǎn)染,用氣管灌注就比用尾靜脈注射的方法好得多。體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑和核酸的混合物與靶器官的接觸越直接越充分,效果越好。干擾效率可以理解為干擾的細(xì)胞數(shù)量和全部細(xì)胞的數(shù)量的比例。在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,這2個(gè)數(shù)字可以精確計(jì)算。但在動(dòng)物體內(nèi)無(wú)法精確統(tǒng)計(jì)。一般評(píng)估效果,我們建議在分子水平,用RT-PCR,在細(xì)胞水平,用Western-Blot,在組織水平,用病理生理等方法。
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